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溶酶體染色試劑盒的基礎知識,一起學習吧!

更新時間:2018-10-12點擊次數:2915
    本試劑盒可以用于酶標版、免疫組化和流式細胞技術等應用,用于多種不同類型的研究中,包括細胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細胞活性、細胞凋亡和細胞毒性的研究,適用于增殖型和非增殖型細胞,也可以用于懸浮和貼壁細胞。溶酶體染色試劑盒使用方法,準備溶酶體染色試劑盒,室溫避光放置5-10分鐘預熱LysoBrite NIR染料Component A取20µL預熱好的LysoBrite NIR染料(Component A),用10 mL活細胞染色緩沖液Component B進行稀釋。注意,20μL LysoBrite NIR染料(Component A)足夠完成1塊96孔板實驗,剩余的LysoBrite NIR染料(Component A) 可以根據需要分裝避光保存于-20℃,避免反復凍融。優染料濃度根據具體應用會有不同,染色條件根據細胞類型、細胞或組織的染料滲透性不同可以進行調整優化。
    溶酶體染色試劑盒細胞染色,貼壁細胞:在96孔板(100μL)或培養皿內培養細胞,當細胞達到70-80%融合度,在96孔板或培養皿內添加等體積的染色工作液(步驟1.2),在37°C, 5% CO2條件下培養細胞30分鐘-2小時。用 Cy5濾光片在顯微鏡下進行熒光觀察。
    溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具,用來標記亞細胞,細胞器;例如細胞膜、溶酶體、線粒體和細胞核等。Cell Navigator系列細胞器或亞細胞結構標記試劑盒提供全的細胞及相關細胞器熒光標記方案,每種檢測方案均能提供藍色/綠色/紅色/橙色等不同熒光檢測方法。這種的細胞標簽為從空間上和時間上研究發生的細胞活動提供了一種十分有效的方法。注意,如果細胞沒有充分染色,可以適當增加染料濃度或增加染色時間進行改善。懸浮細胞: 在1000 rpm 條件下離心細胞培養液5分鐘,棄去上清,用預熱好的細胞培養液溫和的重懸細胞,然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2),在37°C, 5% CO2條件下培養細胞30分鐘-2小時。用 Cy5濾光片在顯微鏡下進行熒光觀察。
    溶酶體染色試劑盒可以標記活細胞中的溶酶體,使之帶紅色熒光(Ex/Em =636/650 nm)。本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物,屬趨溶酶體染料,染料滲透進入完整的活細胞中,有選擇性進入溶酶體,并因溶酶體膜內外的不同pH環境而被鎖定在溶酶體中。染料一旦進入溶酶體中,熒光顯著性增強并非常穩定。
 

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