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介紹細胞凋亡形態學的幾種檢測方法
2021-11-28 細胞凋亡與壞死是兩種*不同的細胞凋亡形式，根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別，可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多，下面介紹幾種常用的測定方法。根據凋亡細胞固有的形態特征，人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。1、光學顯微鏡和倒置顯微鏡（1）未染色細胞：凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現發泡現象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。（2）染色細胞：常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化，核膜裂解、...
外泌體的提取主要包括以下幾種方式
2021-11-25 外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年，外泌體于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載...
蛋白酶K的配制標準及保存方法
2021-10-26 蛋白酶K廣泛應用于分子生物學,藥理學等科研方面.一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般儲存在-20°C,避光防潮密閉干燥。蛋白酶Ｋ主要應用于基因檢測中基因抽取，是檢測試劑盒生產的重要原料，蛋白酶K產品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白質的能力，因而被廣泛應用于制備脈沖電泳的染色體DNA，以及去除DNA和RNA中的核酸酶。現有基因抽提及檢測試劑盒中均需配備該酶。蛋白酶K配制標準：20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinaseK)：將2...
使用CCK-8要注意的事項有哪些
2021-10-25 CellCountingKit-8（簡稱CCK8）試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。相信做細胞的同學對他都很熟悉，你確定你使用CCK-8試劑的方式是*正確的嗎？使用CCK-8要注意的事項有哪些：1.酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。2.CCK8可以檢測大腸桿菌，但不能檢測酵母細胞。在細胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細菌污染，以免影響結果。3.當在培養箱內培養時，培養板最外一圈的孔最容易干燥揮發，由于體積不準確而增加誤...
胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異有哪些
2021-09-26 胎牛血清（FetalBovineSerum,FBS）是在屠宰懷孕母牛的時候，通過心臟穿刺采取胎牛血獲取的血清，因其未與外界環境接觸，所以血清內IgG等免疫因子相對含量較少，適合用于免疫類細胞的培養。胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異還是很明顯的。首先，胎牛血清總蛋白含量（g/dl）約為2%-4%,新生牛血清約為3.0%-5.0%,成牛血清則高達8%-10%.從蛋白含量上也可以初步判斷一個血清是否為胎牛或新生牛血清，蛋白含量越高說明牛齡越大，目前檢測蛋白含量是初步檢測一項重...
常見的細胞轉染技術可分為瞬時轉染和穩定轉染
2021-08-29 細胞轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析。一般來說，超螺旋質粒DNA轉染效率較高，在轉染后24-72小時內（依賴于各種不同的構建）分析結果，常常用到一些報告系統如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫...
一文帶你了解關于細胞增殖的知識
2021-08-27 一、什么是細胞增殖細胞增殖是生物體的重要生命特征，細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物，以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物，以細胞分裂的方式產生新的細胞，用來補充體內衰老或死亡的細胞。二、細胞增殖的意義和方式意義：細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一，是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發育、繁殖以及遺傳的基礎。方式：真核生物的分裂依據過程不同有三種方式，有有絲分裂，無絲分裂，減數分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、真菌等一切真核生物中的一種zui為普遍的分...
預染蛋白Marker和未預染蛋白Marker有哪些不一樣
2021-07-27 在Western實驗中，蛋白Marker可以監控蛋白質在SDS-PAGE中的遷移，監控蛋白的轉膜效率，確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是westernblot實驗成功的條件之一。蛋白Marker分為兩種：一種是未預染的Marker，即寬分子量蛋白標準，高分子量蛋白標準及低分子量蛋白標準；另一種是預染的Marker，即單色預染和多色預染。一、未預染蛋白Marker未預染的蛋白Marker是簡單，也是最準確的一種，由于沒有附帶染料分子或者標記大小正好是蛋白原本的大小...

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