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如何避免胎牛血清使用時出現黑點
2021-06-27 在細胞培養過程中，經常加入5%-20%的Gibco胎牛血清，最常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜，影響后續實驗的結果，我們在實驗中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養293T細胞，效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清，要根據具體細胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法。對此一定要做好以下幾點。方可使細胞培養順利。（1）盡可能地減少血清凍融次數。（...
這樣做能防止胎牛血清產生沉淀
2021-05-30 沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性，不會影響產品性質。要除去沉淀，離心血清(400g，1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部，將血清小心的轉移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀，因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以，使用產品時要搖動并加熱血清至37℃，沉淀會自然消失。如何避免胎牛血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生：(1)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發生。(2)血清分裝凍...
帶你了解細胞凋亡檢測試劑盒的知識
2021-04-19 細胞凋亡是細胞的基本特征之一，它在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定等方面起著十分重要的作用。形態學檢測是研究細胞凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態學變化是多階段的，起初，細胞間連接和微絨毛消失，細胞體積縮小，胞漿凝縮，內質網變疏松并與胞膜融合，形成一個個空泡，核糖體與線粒體等細胞器聚集，結構尚無明顯改變，細胞核內的染色質逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊，細胞核固縮呈均一的致密物，進而斷裂成碎塊，此時細胞膜仍保持完整：然后，胞膜及核膜不斷出芽、脫落，一個細胞變成數個大小不等的有膜...
液體培養基接種要注意的事項有哪些
2021-02-24 液體培養基，固體培養基的對應詞，是微生物或動植物細胞的液狀培養基。它具有進行通氣培養、振蕩培養的優點。在靜止的條件下，在菌體或培養細胞的周圍，形成透過養分的壁障，養分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下，可消除這種阻礙以及增加供氧量，所以有利于細胞生長，提高生產量。液體培養基接種要注意的事項有哪些：①用酒精棉消毒操作臺面。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側，靠近酒精燈放置。將需要進行液體轉接的試管插在試管架上，置于酒精燈左邊左手附近。將移液器調至合適的刻度放于右手附近的架子上...
影響細胞培養的環境因素有哪些
2021-02-22 細胞培養（cellculture）是指在體外模擬體內環境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個*的過程，細胞培養本身就是細胞的大規模克隆。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術*的環節，而且細胞培養本身就是細胞的克隆。細胞培養技術是細胞生...
選用牛血清白蛋白BSA需要考慮哪些問題
2020-12-12 牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分(38g/100ml)，分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養作用。在動物細胞無血清培養中，添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。牛血清白蛋白BSA，又稱第五組分...
關于牛血清白蛋白BSA的知識你了解多少
2020-12-10 牛血清白蛋白BSA，又稱第五組分，是牛血清中的一種球蛋白，包含583個氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用，例如在westernblot中作為Blockingagent。它是牛血清中的簡單蛋白，是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成，其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自...
哪些因素影響了高保真DNA聚合酶的保真度？
2020-10-22 高保真DNA聚合酶的保真度是指準確復制目的模板的結果。具體來說，這涉及到多個步驟，包括讀取模板鏈，選擇正確的三磷酸核苷，并將此核苷酸插入3’引物末端的能力。為了區分正確和錯誤的核苷酸，一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。這種“校正”活性可切除不正確摻入的單核苷酸，并將其替換成正確的核苷酸。高保真PCR使用摻入錯誤率低且具有校正活性的DNA聚合酶，以保證目的DNA的忠實復制。在設計PCR實驗時，你首先要考慮你的應用是否需要高保真聚合酶。如果實驗結果依賴于正確的DNA序...

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